Il dominio dei duchi di Nassau a Wiesbaden ebbe fine con un "brevetto di presa di possesso dell'ex ducato di Nassau" firmato dal re Guglielmo di Prussia al Palazzo di Babelsberg, vicino a Berlino, il 3 ottobre 1866.

L'evento era stato preceduto da un conflitto militare tra Prussia e Austria, apparentemente sorto a causa di disaccordi tra i due Stati sull'amministrazione congiunta dello Schleswig-Holstein. La Prussia cercava di annettere questo territorio e aveva già concluso un'alleanza offensiva segreta con l'Italia contro l'Austria nell'aprile 1866, in violazione del trattato su cui si basava la Confederazione tedesca. La vera battaglia era per la supremazia prussiana in Germania, che Bismarck voleva decidere a favore della corona prussiana a tutti i costi - con la guerra, se necessario.

Solo tre settimane dopo l'inizio della guerra, i prussiani ottennero una vittoria decisiva nella Battaglia di Königgrätz il 3 luglio 1866, che culminò nella Pace preliminare di Nikolsburg il 26 luglio 1866. Nella pace finale di Praga del 23 agosto 1866, l'Austria accettò la dissoluzione della Confederazione tedesca e l'incorporazione di diversi Stati tedeschi di piccole e medie dimensioni, tra cui Nassau, che aveva combattuto dalla parte austriaca, da parte della Prussia.

Le truppe prussiane avevano già invaso il nord di Nassau il 28 luglio 1866 e occupato temporaneamente Montabaur, Dillenburg, Herborn ed Ems. Dopo la battaglia di Königgrätz, Bismarck ordinò all'Armata principale prussiana di occupare l'intero ducato. Il duca Adolph zu Nassau lasciò Wiesbaden il 15 luglio. I negoziati di compensazione con la Prussia si trascinarono per oltre un anno. Nell'accordo di compensazione del 18 settembre 1867, gli fu garantita la proprietà dei palazzi di Biebrich e Weilburg, del castello di caccia Platte vicino a Wiesbaden, del Paulinenschlösschen e di alcune proprietà forestali. Inoltre, ricevette una compensazione finanziaria per un totale di oltre 15 milioni di fiorini. Wiesbaden fu occupata dalle truppe prussiane il 18 luglio 1866.

L'annessione di Nassau incontrò poca opposizione da parte della popolazione. Il 29 luglio, l'ex amministratore distrettuale di Wetzlar, Gustav von Diest, assunse l'amministrazione di Nassau come commissario civile e fu in grado di promuovere la monarchia prussiana con misure volte a creare fiducia. Alla cerimonia di proclamazione della presa di potere, il 9 ottobre 1866, le bandiere prussiana e di Nassau sventolarono fianco a fianco sulla Schillerplatz.